Revisión de una secuencia HPLC: hoja de trabajo

Datos sintéticos y criterios didácticos ficticios. No se proporciona un límite de aceptación para el laboratorio.

Cada caso es un fragmento retrospectivo y ficticio: la inyección 01 es un blanco de disolvente, la 02 una mezcla de referencia de dos componentes y la 03 una muestra. No se aporta el historial anterior. La muestra registrada en B forma parte del ejercicio; no autoriza a continuar una secuencia real tras incumplir una comprobación.

wb es aquí la anchura de base definida por tangentes, no la anchura a media altura. Para los componentes gaussianos dados, wb = 4σ. Las colas nunca llegan realmente a cero; la anchura procede de las intersecciones con la línea de base de las tangentes en ambos puntos de inflexión.

Rₛ = 2 × (tᵣ₂ − tᵣ₁) / (wb1 + wb2)

Usa minutos tanto para tiempos de retención como para anchuras. Incluye ambas anchuras distintas en el denominador. No introduzcas una anchura a media altura en esta fórmula de anchuras de base.

IUPAC: Rₛ · IUPAC: wb

Regla didáctica 1: el par de referencia cumple cuando Rₛ ≥ 1,50, incluida la igualdad. Este número es una elección ficticia del ejercicio, no un requisito general de HPLC.

Regla didáctica 2: señala un componente modelado del blanco cuyo máximo esté entre 3,80 y 4,20 min, extremos incluidos, y cuya altura sea ≥ 0,020 AU. Esta regla simplificada de componentes no es un límite de detección ni una política real de aceptación del blanco.

Valores de referencia y observaciones del blanco — todos sintéticos

Esta tabla se desplaza horizontalmente. Enfoca la región de la tabla y usa las flechas izquierda y derecha.

Secuenciatᵣ₁ / mintᵣ₂ / minwb1 / minwb2 / minComponente del blanco
A4,005,600,801,20Ninguno modelado
B4,005,200,801,20Ninguno modelado
C4,005,600,801,20U1: 4,02 min; 0,060 AU

Todas las señales son sumas de componentes gaussianos sin ruido, en unidades arbitrarias de señal (AU). Un blanco plano significa que no se incluyeron componentes; no es un resultado medido de «no detectado». Las etiquetas S1/S2 de la muestra no afirman identidad química, pureza ni concentración.

Anotar una decisión para cada caso

  1. Calcula Rₛ a partir del par de referencia, manteniendo ambas anchuras de base en el denominador. Compáralo con la regla ficticia ≥ 1,50.
  2. Valora el blanco por separado con la ventana y la regla de altura indicadas. Registra lo observado sin asignarle identidad química ni causa.
  3. Indica qué comprobación didáctica se cumple o queda abierta. Después, nombra las pruebas que faltan antes de aceptar un resultado analítico real.

Registrar el cálculo y la decisión con sus límites

Esta tabla se desplaza horizontalmente. Enfoca la región de la tabla y usa las flechas izquierda y derecha.

SecuenciaCálculo de RₛComprobación de resoluciónObservación / señal del blancoDecisión y pruebas pendientes
A
B
C

En C, ¿por qué la señal del blanco no puede atribuirse a la inyección de referencia posterior? ¿Qué registros anteriores o comprobaciones dirigidas ayudarían a investigarla?

Fuentes y reutilización

  1. ICH Q14 (2023), sección 6, p. impresa 6: estrategia de control del procedimiento analítico
  2. IUPAC Gold Book: resolución de picos, P04465
  3. IUPAC Gold Book: anchura de base, 09903